淺析酶底物法檢測菌落總數整體解決方案_酶底物法檢測儀器,程控定量封口機,大腸菌群檢測,酶底物試劑,97/51孔定量檢測盤生產廠家-西安立科環保有限公司

淺析酶底物法檢測菌落總數整體解決方案

添加時間：2023-12-12

　　菌落總數作為水廠每日必檢的一個項目，通常與水體受到有機物污染的程度成正相關，其結果可以作為評判水質清潔程度和考核凈化效果的指標。

傳統的平皿計數法在檢測過程中面臨著多種挑戰，比如：對于環境和人員操作要求非常嚴格，前期準備時間長，需要配置培養基，測試結果因菌落較小或出現菌落蔓延導致結果計數偏差且不易觀察等。

在2023年10月1日正式實施的GB/T 5750.12-2023中針對水中菌落總數檢測新增加了酶底物法檢測方法。該方法相較于傳統的平皿計數法中存在的痛點，酶底物法在檢測結果準確性、使用便捷性以及環境和人員操作要求等方面，都有很大幅度改善。

酶底物法檢測試劑使用基于復合酶底物計數的培養基，培養基中含有多種酶底物，能夠被微生物生長過程中產生的酶水解。

在36℃±1℃條件下培養48 h后可釋放熒光物質4-甲基傘形酮（4-MU），其在366 nm紫外燈照射下可發出藍色熒光，配合84孔定量盤使用，對呈現藍色熒光的培養盤孔槽，進行計數并對比MPN表，即可確定原始水樣中可能的菌落總數。

酶底物法檢測菌落總數方法與傳統平皿法檢測方法對比

環節	方法對比
環節	平皿計數法	酶底物法
前期準備	需要提前配置培養基，進行滅菌	無需培養基準備，隨取隨用，方便快捷
操作過程	加樣、注皿、冷卻等，操作繁瑣、時間長	直接加樣、倒盤，操作時間不少于1分鐘，簡便快捷，可有效節省人工成本和縮短操作時間
檢測范圍	30~300cfu/ml	無需稀釋可檢1-738MPN/ml,范圍更大
測試結果	1、需要耗費較多精力進行菌落肉眼計數 2、容易出現操作不當，造成菌落蔓延，導致結果無法有效計數	1、孔槽數量固定，直接計數熒光孔，查閱MPN表，即可確定水樣中可能菌落總數 2、檢測結果準確、穩定 3、可以避免菌落蔓延干擾，準確計數
人員、環境要求	對于人員操作要求非常嚴格（需要專業的無菌操作技術）	降低人員操作的要求，方便、簡單、快捷

由此我們可以看出，酶底物法檢測相較于傳統的平皿法優勢多多：

1、操作便捷
無需準備瓊脂平板，手工操作少于1min操作簡單，降低了操作過程中的污染風險。

2、檢測范圍廣
檢測范圍為：1~738MPN/mL，比平板計數法范圍大，克服平板計數時部分菌落生長過快，計數不準確的缺點。

3、快速讀取結果
48h顯示結果，72h內觀察結果仍然有效，減少人員加班。

在國標中菌落總數“平皿計數法”的檢測方法自1985年一直沿用至今，由于成本低而被廣大實驗室所接受，但是已經不能滿足現代的實驗室檢測要求。而酶底物法則完全彌補了平皿計數法的不足，該方法穩定、檢測結果準確可靠，且操作簡便、快捷，更加適于普及推廣。

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