酶底物法檢測水中總大腸菌群大腸埃希氏菌的影
近年來隨著國家對環境問題日益重視,越來越多的檢測設備和技術應用于水質檢測中。水質檢測是一項技術性非常強的系統工程,影響檢測結果和檢測數據的因素較多,只有嚴格控制相關的影響因素,確保在標準環境下進行采樣、檢測和分析,才能提高檢測結果的準確性。本文對酶底物法檢測水中總大腸菌群大腸埃希氏菌的影響因素進行了調研分析,現將有關情況報道如下。
1.資料與方法
1.1 基礎資料和流程
選取我縣某鄉鎮水站的入廠水、出廠水、水源水進行樣品采集。按照水樣采集流程,主要應用的儀器設備或材料有:紫外燈、恒溫培養箱、51孔定量盤封口機、51孔定量盤、100毫升滅菌玻璃瓶,51孔定量盤陽性比色盤和大腸菌群檢測試劑等。
1.2 觀察檢測
樣品采集及水質檢驗按照《生活飲用水標準檢驗方法-水樣采集和保存》(GB/T5750.2-2006﹚進行樣品采集;檢驗方法按照《生活飲用水標準檢驗方法》﹙GB5750.12-2006﹚執行;監測結果評價依據GB5749-2006(生活飲用水衛生標準)及有關規定進行評價。對不同環境(自然環境、無菌環境)、不同溫度、不同培養時間逐項進行檢測法分析,并對結果進行觀察記錄。
1.3 統計學處理
采用SPSS16.0專業統計軟件對各類數據進行分析處理,同時引入t檢驗、χ2檢驗,以P<0.05作為差異標準,具有統計學意義。
2.結果
2.1 不同環境對水中總大腸菌群、大腸埃希氏菌檢測結果的影響分析(如表1所示,單位:MPN?100mL-1)
項目 |
不同環境對檢測結果的影響分析 |
總大腸菌群 |
大腸埃希氏菌 |
無菌環境 |
自然環境 |
無菌環境 |
自然環境 |
樣品1 |
11.1 |
12.4 |
7.5 |
8.5 |
樣品2 |
13.7 |
15 |
8.7 |
8.7 |
樣品3 |
20.7 |
22.2 |
16.4 |
2 |
樣品4 |
5.3 |
6.4 |
3.1 |
3.1 |
樣品5 |
1 |
1 |
1 |
1 |
樣品6 |
144.5 |
165.2 |
88.5 |
94.5 |
樣品7 |
200.5 |
200.5 |
200.5 |
200.5 |
注:上述樣本,樣1到樣4是從該水站不同時間采集到的入廠水樣,樣5是出廠水樣,樣6和樣7是該站水源水樣。
溫度/℃ |
培養溫度對檢測結果的影響統計結果 |
總大腸菌群 |
大腸埃希氏菌 |
樣1 |
樣2 |
樣3 |
樣4 |
樣5 |
樣6 |
樣7 |
樣1 |
樣2 |
樣3 |
樣4 |
樣5 |
樣6 |
樣7 |
28 |
1 |
2 |
9.9 |
1 |
1 |
73.8 |
94.5 |
1 |
1 |
3.1 |
1 |
1 |
59.1 |
78.2 |
32 |
4.2 |
7.5 |
15 |
4.2 |
1 |
94.5 |
201.3 |
4.2 |
8.7 |
13.7 |
1 |
1 |
78.2 |
94.5 |
35 |
9.9 |
12.4 |
19.2 |
4.2 |
1 |
129.8 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
15 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
36 |
11.1 |
13.7 |
20.7 |
5.3 |
1 |
144.5 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
16.4 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
37 |
11.1 |
13.7 |
20.7 |
5.3 |
1 |
129.8 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
16.4 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
40 |
1 |
1 |
5.3 |
1 |
1 |
88.5 |
129.8 |
1.0 |
1.0 |
5.3 |
1 |
1 |
42.9 |
88.5 |
時間/h |
培養溫度對檢測結果的影響統計結果 |
總大腸菌群 |
大腸埃希氏菌 |
樣1 |
樣2 |
樣3 |
樣4 |
樣5 |
樣6 |
樣7 |
樣1 |
樣2 |
樣3 |
樣4 |
樣5 |
樣6 |
樣7 |
16 |
1 |
1 |
3.1 |
1 |
1 |
38.4 |
53.1 |
1 |
1 |
3.1 |
1 |
1 |
35.4 |
37.5 |
18 |
2 |
1 |
5.3 |
1 |
1 |
38.4 |
59.1 |
1 |
1 |
4.2 |
1 |
1 |
36.4 |
40.6 |
20 |
4.2 |
2 |
7.5 |
2 |
1 |
45.3 |
73.8 |
1 |
1 |
4.2 |
3.1 |
1 |
36.4 |
40.6 |
22 |
12.4 |
12.4 |
19.2 |
5.3 |
1 |
144.5 |
200.5 |
1 |
1 |
4.2 |
3.1 |
1 |
38.4 |
42.9 |
24 |
11.1 |
13.7 |
20.7 |
5.3 |
1 |
144.5 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
16.4 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
28 |
12.4 |
12.4 |
20.7 |
5.3 |
1 |
144.5 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
16.4 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
32 |
17.8 |
19.2 |
30.6 |
12.4 |
|
200.5 |
200.5 |
11.1 |
12.4 |
23.8 |
5.3 |
1 |
165.2 |
200.5 |
根據檢測結果可以看出,在無菌環境和自然環境中對總大腸菌群和大腸埃希氏菌的檢測值差異不明顯,無統計學意義(P>0.05)。
2.2 培養溫度對水中總大腸菌群、大腸埃希氏菌檢測結果的影響分析(如表2所示,單位:MPN?100mL-1)溫度不同,結果存在不同差異,總大腸菌群、大腸埃希氏菌在溫度28℃、32℃、40℃下檢測結果和溫度為36℃的檢測結果差異明顯,具有統計學意義(P<0.05),35℃、36℃、37℃之間檢測結果差異不明顯,表明培養溫度對總大腸菌群、大腸埃希氏菌影響較大,應當控制在35℃至37℃之間為宜。
2.3 培養時間對水中總大腸菌群、大腸埃希氏菌檢測結果的影響分析(如表3所示,單位:MPN?100mL-1)
根據上述統計結果可以看出,培養時間不同,對水中總大腸菌群、大腸埃希氏菌檢測結果產生不同程度的影響,總大腸菌群培養時間在16h、18h、20h、32h的檢測結果和24h的檢測結果之間差異明顯,具有統計學意義(P<0.05),其他兩兩之間無明顯差異。大腸埃希氏菌培養時間在16h至22h、32h之間的檢測數值和培養24h、28h的檢測結果差異明顯,具有統計學意義(P<0.05),其他兩兩之間無明顯差異。
3.結論
研究表明,總大腸菌群、大腸埃希氏菌在水中的數量和人體腸道致病菌有一定的關聯,所以對于水體污染程度的判定和衛生檢測會以水中總大腸菌群、大腸埃希菌數量為檢測依據,通過運用酶底物法進行檢測,嚴格按照檢測標準和檢測條件進行操作,操作簡便,檢測準確度高,國際上廣泛認可,但是受到不同溫度、檢測時間、環境等影響,對于檢測結果也會產生不同程度的影響,通過此次分析可知,酶底物法檢測水中總大腸菌群、大腸埃希氏菌的影響因素包括檢測溫度和檢測時間兩個方面,和實驗室檢測環境是否無菌等關聯度不大,所以在開展檢測時為保證檢測的準確度,應當嚴格控制好培養溫度和培養時間,從而提高檢測結果的效度和信度,為生活飲用水的日常衛生監督管理提供科學依據。
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