一、 酶底物法檢測系統用途:
酶底物法測定用途:用于檢測水中總大腸菌群糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)和大腸埃希氏菌。可用于檢測水的類型:飲用水、水源水、廢水、食品水、地表水、地下水、海水、瓶裝水、中水、二次供水、管網水、畜牧用水、醫療用水等。
二、 酶底物法檢測系統原理:
酶底物法采用 ONPG 和 MUG 兩種營養指示劑,這兩種試劑分別可以被大腸菌群的β-半乳糖苷酶和大腸桿菌的 β-葡糖醛酸酶分解代謝。當大腸菌群在酶底物檢測試劑中生長時,其使用 β-半乳糖苷酶分解代謝 ONPG,并使樣品從無色變為黃色。大腸桿菌使用 β-葡糖醛酸酶分解代謝 MUG 時,能夠發出熒光。
三、 酶底物檢測系統優勢特點:
酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸桿菌檢測標準方法,酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測的先進方法,目前在發達國家水質大腸菌群檢測分別占到95%和90%的市場,以其方便快捷,假陽性低,適用大量樣品快速檢測等優點正逐步被國內檢測部門所認可。
相對于多管發酵和濾膜法,酶底物法檢測步驟大大減少,而且對實驗環境要求不高,檢測時間可減少到24小時,在日常水樣監測及應急監測中具有很好的應用前景,可及時檢測,預防,大限度的減少重大公共安全事故的發生幾率。 以GB5750-2006中總大腸菌群測定為例,比較三種方法,如表所示。
表1 多管發酵法、濾膜法及酶底物法比較統計
方法優勢:
1.無需在無菌室內操作。
2.手工操作時間小于1分鐘。
3.無需培養基制備和大量玻璃器皿滅菌。
4.24小時即可完成定性定量分析,無需驗證試驗。
已經列入
1.GB/T5750.12-2006《生活飲用水標準檢驗方法》微生物指標。
四、酶底物法檢測系統產品特點:
1.colitech酶底物法檢測試劑,LK定量檢測盤/定量孔板,LK定量瓶出廠前均已滅菌,客戶可以直接放心使用。
2.colitech酶底物法檢測試劑是我公司潛心研制并符合GB/T5750.12-2006的酶底物法培養基,假陽性和假陰性均優于傳統方法。
3.colitech酶底物法檢測試劑經大量客戶實驗室使用和驗證,表明與傳統方法多管發酵法和濾膜法具有方法一致性和可比性。
準確/可信
● 使用MPN法進行定量檢測,可直接檢測100毫升水樣中1~2419MPN(個)目標細菌
● 精確檢出100ml水樣中單個的活性大腸桿菌群和大腸埃希氏菌,假陰性低
● 每個單位試劑可抑制上百萬個異養細菌,假陽性低
● 無需驗證試驗,準確性高于濾膜法及多管發酵法
● 符合中國國家標準GB/T5750.12-2006《生活飲用水檢驗標準》
簡單/快捷
● 檢測時間不超過24小時,無需確證試驗
● 簡單培訓就能輕松使用,手工操作少于一分鐘
● 不會因為過濾阻塞(濾膜法)或異養細胞的干擾(多管發酵法)而產生數據誤差 ● 無需玻璃器皿清洗及菌落計數,減輕實驗人員工作量
● 適用于大量樣品的批量快速檢測 四、 配件以及技術方案:
針對酶底物法檢測的原理采購相應的設備。用途如下:
酶底物檢測試劑:用于選擇性檢測水中的目標細菌。
51或97定量檢測盤:用于判斷目標微生物數量。
100毫升定量瓶/取樣瓶:專業的為水樣與試劑提供溶解環境。
紫外手持式紫外分析儀帶暗室:測定大腸埃希氏菌時用于在暗室中觀察熒光。
五、 酶底物法檢測系統操作方法:
一步:將水樣加入100ml取樣瓶中,加入酶底物法檢測試劑,擰緊蓋子搖勻至完全溶解。
第二步:將樣品加到定量檢測盤中。
第三步:使用程控定量封口機對定量檢測盤進行樣品分配及封口
第四步:將封口好的定量檢測盤放在36±1℃,如需測定糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)則將培養箱設定為44.5℃,培養24h.
第五步:對照比色盤數陽性(顯黃色,或熒光)格子數,按照使用的檢測盤類型,分別查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大腸菌群的菌群數。對照MPN表出數據。
第六步:根據稀釋倍數結果按公式計算結果
大腸菌群(個/L)=MPN值×稀釋倍數×1000mL/100mL