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科普知識
酶底物試劑工作原理
添加時間:2020-07-09
  Colilertechech酶底物試劑利用技術固定底物技術酶底物法® (DST®) 同時檢測總大腸菌群和大腸桿菌。 Colilertech酶底物試劑 采用該檢測方法采用大腸桿菌產生β-半乳糖苷酶分解色源底物ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 使培養液呈黃色。大腸埃希氏菌產生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide)使培養液在波長366 nm 紫外光下產生熒光的原理,來定性定量水中總大腸菌群、糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)及大腸埃希氏菌。

這兩種試劑分別可以被大腸菌群的β-半乳糖苷酶和大腸桿菌的β-葡糖醛酸酶分解代謝。

當大腸菌群在 Colilertech 中生長時,其使用β-半乳糖苷酶分解代謝 ONPG,并使樣品從無色變為黃色。

 
大腸桿菌使用 β-葡糖醛酸酶分解代謝 MUG 時,能夠發出熒光。 因為絕大多數的非大腸菌群雜菌不產生這些酶,所以雜菌不能生長和產生干擾。
極少量的能產生這種酶的非大腸菌群的雜菌也會被 Colilertech 的特殊配方的抑制劑選擇性抑制。

這種培養基和傳統的培養基不同,傳統的培養基提供了豐富的營養環境,可以同時支持目標微生物和非目標微生物的生長。 當非目標微生物生長并模仿目標微生物時,此時就產生了假陽性。 傳統培養基中非目標微生物的生長還可以抑制目標微生物,這就導致假陰性的出現。 為了抑制非目標微生物,傳統培養基通常加入高濃度的鹽、洗滌劑或其他選擇性的試劑,這些試劑可能會無意地抑制目標微生物,進而導致假陰性。
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