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科普知識
檢測大腸桿菌新方法之酶底物法
添加時間:2020-07-09
  酶底物法 以其快速、簡便、準確的特點檢測大腸桿菌,較其他方法更加簡便和精準并且無需驗證。
在國家標準<GBT5750.12一2006生活飲用水標準檢驗方法>中介紹了大腸菌群和大腸桿菌酶底物法。大腸菌群酶底物法是指在選擇性培養基上能產生β一半乳糖昔酶(β-D-galactosidase)的細菌群組,該細菌群組能分解色原底物釋放出色原體使培養基呈現顏色變化,以此技術來檢測水中總大腸菌群的方法。大腸桿菌酶底物法是指在選擇性培養基上能產生p一半乳糖昔酶(β-D-galactosidase)分解色原底物釋放出色原體使培養基呈現顏色變化,并能產生壓葡萄糖醛酸酶(β一ghicuronidase)分解熒光底物釋放出熒光產物,使菌落能夠在紫外光下產生特征性熒光,以此技術來檢測大腸埃希氏菌的方法為大腸埃希氏菌酶底物法。 

酶底物法之所以可以入選國家標準,是由于根據相關研究報道,幾乎所有的大腸菌群都有β-D-半乳糖普酶β-D-galactosidase)活性,94%一97%的大腸桿菌具有β-D-葡糖醛酸糖普酶(β-D-一glucuronidase)活性,而且水體和食品中都缺少這兩種酶。因此,基于這兩種酶的水體和食品中大腸菌群和大腸桿菌的檢測方法得到了迅速的發展。報道的一種安培生物傳感器應用對氨基酚β-D-毗喃半乳糖苷(PAPG)作為底物,能夠在60一7min內檢測1000 cfu/ml的大腸桿菌,采用預培養步驟可將靈敏度提高約一百倍。
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